首先检查锅内蒸馏水量是否充足。仪表盘上高水位指示灯是否亮起，否则及时加水。在外层锅内加适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
将待灭菌的物品用一层牛皮纸或两层报纸或锡纸包好，一定要包完整。500ml溶液瓶和装EP管的器皿要轻微开口。放入锅内，物与物之间一定要有空隙。
盖好锅盖，螺母对称拧紧，打开放气阀，关闭安全阀。在是表盘上设定温度121℃，时间25~30min，开始加热。
灭菌结束后，让其自然冷后（50℃以下）再慢慢打开排气阀以排除余气，然后才能开盖取物。
灭菌完毕后，不可放气减压，否则瓶内液体会剧烈沸腾，冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。
高压灭菌锅又名高压蒸汽灭菌锅，可分为手提式灭菌锅和立式高压灭菌锅。利用电热丝加热水产生蒸汽，并能维持很多压力的装置。主要有一个可以密封的桶体，压力表，排气阀，安全阀，电热丝等组成。
适用于医疗卫生事业，科研，农业等单位，对医疗器械，敷料，玻璃器皿，溶液培养基等做消毒灭菌，是理想的设备。手提式高压灭菌锅是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证的检验设备.
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